MALDI_龙8国际 MALDI_龙8国际

龙8国际

 0371-68273998

MALDI-TOF MS在临床微手机检验中的应用进展(上)

MALDI-TOF MS(Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization Time of Flight Mass Spectrometry)即基质辅助激光解析电离飞行时间质谱,作为一种新型的软电离手机质谱技术,被越来越多的应用于生命科学等领域的多个学科,不仅具有灵敏度高、准确度高且易于自动化等优势。

目前,MALDI-TOF MS在食源性监测及科研等中的应用日益增多,也被临床实验室逐渐所采纳,同时,MALDI-TOF MS检测的快速、对急性病例或特殊病原菌的准确检测及其在耐药方面的应用使其拥有更好的发展前景。目前,应用传统的化学方法对常见细菌进行鉴定,仍然是现在大多数实验室所采取的鉴定方法,如革兰氏染色、氧化酶等生化反应,或者是采用梅里埃公司的API和Vitek鉴定系统。但是对于一些难鉴定菌及培养要求苛刻的病原体,常规鉴定方法并不能满足实验室及临床的应用。然而,MALDI-TOF MS技术不仅能够快速鉴定,而且也为微需氧菌、厌氧菌、真菌、结核分枝杆菌及病毒等难鉴定、难培养病原体的鉴定弥补了生化鉴定方面的不足。

MALDI-TOF MS的基本原理

1  MALDI-TOF MS的组成

long8cc主要由两部分组成:基质辅助激光解吸电离离子源(MALDI)、飞行时间质量分析器(TOF)。

2  MALDI-TOF MS的工作原理

基于不同的微手机具有不同的娱乐质谱图,而MALDI-TOF MS可电离相对分子质量为100~1000000的手机分子,电离后不同的离子又具有不同的质荷比,质谱也能找出种间和株间特异保守峰作为手机标记从而将其区分开,所以MALDI的具体原理是用激光照射样品与基质形成的共结晶薄膜,基质从激光中吸收能量传递给手机分子,而电离过程中将质子转移到手机分子或从手机分子得到质子,从而使手机分子电离,适用于混合物及手机大分子的测定。而TOF的原理是离子在电场作用下加速飞过飞行管道,根据到达检测器的飞行时间不同而被检测,即测定离子的质荷比(M/Z)与离子的飞行时间成正比检测离子。根据检测的结果与数据库中的参考图谱进行比对,从而得到结果。

质谱目前仍存在的缺陷

MALDI-TOF MS技术利用自己独特的优势,在多个领域都起到了至关重要的作用,然而,由于技术的不够完善及临床要求的不断提高,MALDI-TOF MS的缺陷也一一显现出来。

1  成本高

作为一项新技术,MALDI-TOF MS虽在多个领域都显示出它的优势,然而最初的long8cc成本高是我们不得不接受的事实,这就使一些临床机构望而却步。

2  对样本的前处理要求高

由于MALDI-TOF MS技术的原理是基于不同的娱乐质谱图,所以需要纯培养或单个菌落,这就为难培养病原体提出了新的挑战,也增加了标本的前处理难度。而且MALDI-TOF MS也不能将娱乐表达相近的细菌区分,为临床对不同菌种的鉴定提出了挑战。

3  数据库尚需完善

临床的需求不断增加,现有的数据库并不能满足临床的需求,对一些不常见病原体,MALDI-TOF MS缺乏相应的数据库,因此我们需要去丰富现有数据库,增加一些罕见菌的质谱图来满足临床的需要。

4  目前主要集中于定性

基于MALDI-TOF MS技术的原理,我们只能对病原体做到定性,很难做到定量。虽然在抗生素耐药方面我们已经取得了一定的成效,但是对抗生素耐药性的检测能力有限。而且作为一项新技术对于报告结果的验证和解释缺乏统一的实用性的操作手册,因此仍我们要求在以后的科研和工作中不断去钻研去完善。

(文章来源:检验视界网)

龙8app客户端下载乐虎国际客户端下载beplayer体育下载